Kvantitativní vyšetření glukózy v moči (glykosurie): metody

Glukóza je nejčastějším cukrem v moči, ostatní cukry jsou méně časté. Do moče se dostává z krevního oběhu glomerulární filtrací. Většina glukózy je však v ledvinových tubulech vstřebávána zpět do krve.

Kapacita tubulárních buněk pro resorpci glukózy je 8 - 11 mmol/l v plazmě, tzv. ledvinový práh pro glukózu. Je-li ledvinový práh překročen, glukóza se dostává do moče. Při posuzování výsledků je nutno mít na paměti, že renální práh pro glukózu má značné individuální kolísání. U diabetiků může být renální práh zvýšen až na hodnoty 14 - 16 mmol/l.

Glykosurie = cukry v moči (správnější je rozlišovat: glukosurii, fruktosurii, laktosurii atd.)

Příčiny glykosurie:

• Prerenální: je překročen ledvinový práh pro glukózu ⇒ glukóza přechází do moči. Příčina: alimentární glykosurie (požitím velkého množství glukózy, kdy glykémie překročí hodnotu ≈ 10 mmol/l po dobu ≥ 15 min), při nesprávné rychlosti podávání glukózy při infuzi a diabetes mellitus.
• Renální: je snížen ledvinový práh pro glukózu (pod 9 mmol/l) ⇒ ↑glykosurie, ale normální hodnoty glykémie. Příčina: těhotenství, renální onemocnění (porucha ledvinných tubulů) a toxické poškození ledvin (např. otrava rtutí).

Další příčiny glykosurie: závažné poruchy jater (cirhóza, infekční žloutenka), nitrolební nádory, nádory dřeně nadledvin, podání adrenalinu, ACTH aj. kortikoidů a akutní pankreatitida aj.

Čtěte také: Podrobný pohled na kvantitativní vyšetření glukózy

Referenční hodnoty glykosurie: 0,1 - 0,8 mmol/l v ranní moči (někdy se uvádí do 0,56 mmol/l), což je pod prahem citlivosti většiny metod. Je-li koncentrace < 0,1 mmol/l, jde pravděpodobně o zvýšenou bakteriurii (přítomnost bakterií, které metabolizují glukózu).

Při stanovení glukózy ve sbírané moči se moč sbírá po dobu 6, 8, 12 nebo 24 hodin do sběrné nádoby bez přídavku konzervačních látek. Při sběru moče je nutné zabránit bakteriální kontaminaci, moč se uchovává v chladničce. Před odlitím vzorku moči ze sběrné nádoby se moč důkladně promíchá a změří se její objem s přesností na 10 ml (u velmi malých dětí s přesností na 1 ml).

Metody stanovení glukózy

Stanovení diagnostickými proužky

Princip metody: Glukóza se oxiduje vzdušným kyslíkem na kyselinu glukonovou za katalytického působení glukózooxidázy. Při reakci se uvolňuje peroxid vodíku, který oxiduje nebarevnou formu chromogenu (tetrametylbenzidin) na oxidovanou zeleně zbarvenou formu (benzidinová modř). Reakci katalyzuje peroxidáza.

Hodnocení: Srovnáme zbarvení se stupnicí na obalu po 1 min. Citlivost: ≈ 2 mmol/l

Falešně pozitivní výsledky: při znečištění nádob oxidačními prostředky, které se používají k dekontaminaci nádob pro sběr moče (př. chloramin, persteril) a uchovávání proužků v otevřených tubách.

Čtěte také: O kvantitativních metodách studia ekologie

Falešně negativní výsledky: nadměrná koncentrace vitaminu C v moči, která je způsobena i užíváním vitaminových tablet a směsí, dále např. infuzemi obsahujícími vitamin C, kyselina homogentisová (alkaptonurie), dlouhá doba transportu, brzká doba odečtu (< 1 min), močová infekce a léčba antibiotiky, salicyláty apod.

Diagnostické proužky jsou pro glukózu specifické. Přítomnost jiných cukrů (galaktóza, fruktóza, pentózy) nevede ke zbarvení.

Benediktova zkouška

Při podezření na neglukózovou glykosurii (např. u novorozenců) se obvykle provádí orientační Benediktova zkouška, k upřesnění (galaktosurie, fruktosurie) se pak využívají složitější specifické metody.

Princip metody: Glukóza redukuje za varu měďnatou sůl v alkalickém prostředí za přítomnosti uhličitanu sodného a citronanu sodného na oxid měďný (Cu2O), jehož disperze charakteristicky zbarví roztok. Po ochlazení se hodnotí modré a zelené zbarvení čirého obsahu zkumavky nebo zelená, oranžová až červená sraženina. Výsledek se uvádí v arbitrárních jednotkách (+, ++, atd.).

Před prováděním redukčních zkoušek je nutno zjistit, zda moč neobsahuje bílkovinu, která má také redukční vlastnosti. Jestliže je bílkovina v moči přítomna, je nutná deproteinace (např. varem) a bílkovinu následně odstranit např. filtrací nebo centrifugací. Další stanovení glukózy je prováděno ve filtrátu resp. v supernatantu.

Čtěte také: Studie bioplynových transformací odpadu

Reagencie: Benediktovo činidlo: 17,3 g CuSO4 . 5 H2O rozpustit ve 100 ml vody, 100 g bezvodého Na2CO3 a 173 g citronanu sodného p.a. rozpustit v 700 ml destilované vody. Roztok a) a b) přefiltrovat do 1 000 ml odměrné baňky, promíchat a doplnit po rysku.

Pro deproteinaci se připraví: octanový pufr o c = 2 mol/l a pH = 4,6, 60 ml ledové kyseliny octové p.a. smícháme se 125,2 g CH3COONa . 3 H2O a doplníme destilovanou vodou do 1 000 ml.

Provedení: Obsahuje-li moč bílkovinu, provede se deproteinace: 5 ml moče + 1 ml octanového pufru povařit, sraženinu odfiltrovat a dále pracovat s filtrátem. 2,5 ml Benediktova činidla + 4 kapky (0,1 ml) moče po deproteinaci. Promíchat a 1 - 2 min vařit nad malým plamenem (OPATRNĚ, za stálého protřepávání - alkalické roztoky snadno vzkypí!) nebo 5 minut ve vroucí vodní lázni, vychladit a vyhodnotit.

Hodnocení: Benediktova zkouška není pro glukózu specifická, reagují i jiné redukující cukry a redukující látky. Nesprávně pozitivní výsledky jsou např. v přítomnosti zvýšené koncentrace kyseliny močové, vitaminu C, salicylátů a dalších redukujících látek.

tags: #kvantitativní #vyšetření #glukózy #v #moči #glykosurie

Oblíbené příspěvky:

• Zajímavosti z Pacifiku
• Odpad z kuchyně v ČR
• Diskuze o životě v přírodě
• Trubač kořenující: Průvodce
• Výrobci ekologických vozidel